納米PCR試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些？

　　納米PCR試劑盒使用的注意事項(xiàng)：
 

　　1、組份A中含有染料，染料的加入不影響PCR反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物可直接電泳，節(jié)省時(shí)間。
 

　　2、本試劑盒檢測(cè)范圍涵蓋支原體所有種屬，真核細(xì)胞和革蘭氏陰性菌不會(huì)造成干擾，與支原體親緣關(guān)系較近的革蘭氏陽(yáng)性菌在反應(yīng)中的靈敏度較支原體低1000-10000倍。
 

　　3、本試劑盒適用于檢測(cè)支原體感染，客戶如需區(qū)分感染的種屬，可將PCR產(chǎn)物切膠然后測(cè)序，進(jìn)行序列比對(duì)即可知種屬類型。
 

　　4、有時(shí)可直接用細(xì)胞培養(yǎng)上清進(jìn)行PCR反應(yīng)。培養(yǎng)上清中常含有高濃度的PCR抑制劑，可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果，故不建議使用此法。有些PCR抑制劑用離心可以除去，若離心不能去除，則推薦抽提基因組DNA進(jìn)行PCR。而某些PCR抑制劑。
 

　　5、假陰性結(jié)果判斷方法：在測(cè)試反應(yīng)管中同時(shí)加入測(cè)試樣品和陽(yáng)性對(duì)照樣品，觀察對(duì)照條帶是否出現(xiàn)。在陽(yáng)性對(duì)照管出現(xiàn)對(duì)照條帶的情況下，如果測(cè)試反應(yīng)管的對(duì)照條帶和檢測(cè)條帶都沒有出現(xiàn)，則可判斷為PCR反應(yīng)受到了抑制，即假陰性結(jié)果。陽(yáng)性對(duì)照管如果沒有出現(xiàn)對(duì)照條帶，請(qǐng)檢查PCR條件是否恰當(dāng)，或者與技術(shù)支持聯(lián)系。
 

　　6、每個(gè)測(cè)試樣品建議做兩個(gè)反應(yīng)：一個(gè)與陽(yáng)性對(duì)照樣品共同反應(yīng)，排除假陰性結(jié)果，另一個(gè)單獨(dú)反應(yīng)，可避免因加入陽(yáng)性對(duì)照樣品所致的靈敏度降低。如果測(cè)試樣品中支原體含量很高，可能會(huì)抑制陽(yáng)性對(duì)照條帶的出現(xiàn)。