人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，Ishikawa*

人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，Ishikawa*
原本認(rèn)為該細(xì)胞來(lái)源于EnCA101細(xì)胞，但后有文獻(xiàn)報(bào)道該細(xì)胞實(shí)際為Ishikawa細(xì)胞。
細(xì)胞名稱：人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞；ECC-1(Ishikawa)
規(guī)    格：T25培養(yǎng)瓶，1×106cells
形態(tài)特征： 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性：貼壁描述
原本認(rèn)為該細(xì)胞來(lái)源于EnCA101細(xì)胞，但后有文獻(xiàn)報(bào)道該細(xì)胞實(shí)際為Ishikawa細(xì)胞。
培養(yǎng)條件： RPMI 1640(or MEM)  15%FBS
傳代方法：1:2-1:3傳代，每周換液2-3次。
STR位點(diǎn)信息：
STR Profile    AMEL    CSF1PO    D13S317    D16S539    D5S818    D7S820    TH01    TPOX    vWA
ECC-1(Ishikawa)    X    11 12    9 12    9    10 11    9 10    9 10    8    14 17
規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代
包裝：內(nèi)層無(wú)菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源：ATCC
貨期：1-2周

使用權(quán)限 A類(lèi) 

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

方     式： 詳詢經(jīng)理

人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，Ishikawa*
使用權(quán)限 A類(lèi)注意事項(xiàng)：
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 

 
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。